吉林自考网现代生物制药技术 03748

发布日期:2014-06-17 点击次数:2619

单选题
单项选择题
1. 不属于酶工程的主要研究内容是（         ）
酶的分离、提纯及大批量生产； B 酶和细胞 的固定化、酶反应器的研究；
C 酶的分子改造和化学修饰；D 酶标仪的测定研究；
2. 下列选项中，不属于激素类基因工程药物的是（  ）
胰岛素    B 心纳素   C 生长激素   D 白细胞介素 
3. 动物细胞所不具备的生理特点是：（      ）
A 分裂周期短    B 有接触抑制现象   C 对环境敏感  D对培养基要求高    
4. 不属于植物生长激素的是：（     ）
A．生长素； B细胞分裂素；C赤霉素；D白细胞介素
5. 发酵过程中需要进行监测的指标是：（         ）
A菌体浓度    B 湿度   C 细胞数量   D 压强
6. 不属于动物细胞的大规模培养方法是：（     ）
A．离心培养法  B微载体培养法 C中空纤维培养法  D微囊化培养法：
7. 基因工程中常用的工具酶有：（  ）
A．核酸限制性内切酶    B胰酶  C蛋白酶   D．淀粉酶
8. 不能用于单细胞克隆培养的技术是：（     ）
稀释铺板法； B饲养层克隆法；C胶原膜板法；D． 单克隆法
9. 属于动物细胞生物反应器的有：（      ）
A．搅拌式生物反应器；B高温生物反应器；C高压生物反应器；D  外置式生物反应器
10. 不属于小分子抗体的是（      ）
A Fab抗体    B Fv抗体   C 单链抗体   D单克隆抗体
11. 基因工程中常用的工具酶有：（  ）
A．核酸限制性内切酶    B胰酶  C蛋白酶   D淀粉酶
12. 目的基因的常用制备方法有：（  ）
A．提取法   BPCR法   C离心法   D水解法
13. 离体培养的动物细胞对生长基质的具有依赖性，可称为（  ）
A 贴壁依赖性细胞 B上皮细胞型细胞C非贴壁依赖性细胞 D悬浮细胞   
14. 不属于动物细胞的大规模培养方法是：（     ）
A．离心培养法  B微载体培养法 C中空纤维培养法  D微囊化培养法
15. 不属于转基因植物的是：（     ）
A 抗除草剂转基因植物B抗虫基因植物C杂交植物D品质改良基因植物
16. 不属于植物生长激素的是：（     ）
A．生长素 B细胞分裂素C赤霉素D白细胞介素
17. 动物细胞所不具备的生理特点是：（      ）
A 分裂周期短    B 有接触抑制现象   C 对环境敏感  D对培养基要求高    
18. 不属于植物的次级代谢产物的是：（      ）
A皂苷    B 氨基酸   C 黄酮类   D生物碱   
19. 不能用于单细胞克隆培养的技术是：（     ）
A  稀释铺板法 B饲养层克隆法C胶原膜板法D． 单克隆法
20. 属于动物细胞生物反应器的有：（      ）
A．搅拌式生物反应器B高温生物反应器C高压生物反应器D  外置式生物反应器
21. 基因工程中常用的工具酶有：（  ）
A核酸限制性内切酶    B胰酶  C蛋白酶   D淀粉酶
22. 不属于植物的次级代谢产物的是：（      ）
A皂苷    B 氨基酸   C 黄酮类   D生物碱
23. 制备转基因植物过程中，不能用于植物基因转化的受体系统有（    ）
A. 原生质体受体系统 B愈伤组织受体系统C 根受体系统  D胚状体再生系统
24. 利用微生物发酵法生产酶的缺点是:（   ）
A 微生物种类繁多，所生产的酶的品种齐全;
B 微生物生长繁殖快，生长周期短，因而酶的产量高
C生产成本高
D具有更高的酶学活性
25. 离体培养的动物细胞对生长基质的具有依赖性，可称为（  ）
A 贴壁依赖性细胞 B上皮细胞型细胞C永生化细胞 D悬浮细胞
26. 属于动物细胞生物反应器的有：（     ）
A搅拌式生物反应器B高温生物反应器C高压生物反应器D  外置式生物反应器
27. 目的基因的常用制备方法有：（   ）
A提取法   B PCR法   C离心法   D水解法
28. 下列选项中，不属于激素类基因工程药物的是（    ）
A胰岛素    B 心纳素   C 生长激素   D 白细胞介素
29. 人工化学合成的基因片段的缺点有（      ）
A 不能合成长基因    B容易被降解   C 溶解性差   D 不稳定     
30. 不属于动物细胞的大规模培养方法是：（      ）
A离心培养法  B微载体培养法 C中空纤维培养法  D微囊化培养法
31. 酶的固定化可以（     ）
A 降低酶的热稳定性   B  提高酶对有机试剂的稳定性  
C 降低酶的溶解性     D降低酶对PH的稳定性
32. 不属于植物生长激素的是:（     ）
A 生长素 B细胞分裂素C赤霉素D白细胞介素 
33. 不属于转基因植物的是：（      ）
A 抗除草剂转基因植物B抗虫基因植物C杂交植物D品质改良基因植物
34. 与传统固定化酶相比，无载体酶具有的优点是（        ）
A催化活性高 B  催化剂比表面较小 C 只可对一种酶进行固定化
D 底物扩散受限   
35. 不能用于单细胞克隆培养的技术是：（     ）
A  稀释铺板法 B饲养层克隆法C胶原膜板法D 单克隆法
36. 不属于小分子抗体的是（      ）
A  Fab抗体    B Fv抗体   C 单链抗体   D单克隆抗体
37. 不属于植物的次级代谢产物的是：（      ）
A皂苷    B 氨基酸   C 黄酮类   D生物碱
38. 动物细胞所不具备的生理特点是：（      ）
A 分裂周期短    B 有接触抑制现象   C 对环境敏感  D对培养基要求高
39. 基因工程药物分离纯化工艺应遵循的原则有（      ）
A 具有良好稳定性    B 尽量增加工艺步骤   C尽量在高温条件下进行   
D设备条件要求高    
40. 基因工程中常用的工具酶有：（   ）
A核酸限制性内切酶    B胰酶  C蛋白酶   D淀粉酶
41. 与传统固定化酶相比，无载体酶具有的优点是（       ）
A催化活性高 B  催化剂比表面较小 C 只可对一种酶进行固定化  D 底物扩散受限   
42.  不属于转基因植物的是：（      ）
A 抗除草剂转基因植物 B抗虫基因植物 C杂交植物 D品质改良基因植物
43. 基因工程中常用的工具酶有：（   ）
A．核酸限制性内切酶    B胰酶  C蛋白酶   D．淀粉酶
44. 人工化学合成的基因片段的缺点有（      ）
A 不能合成长基因    B容易被降解   C 溶解性差   D 不稳定
45. 下列选项中，不属于激素类基因工程药物的是（   ）
A胰岛素    B 心纳素   C 生长激素   D 白细胞介素
46. 动物细胞所不具备的生理特点是：（     ）
A 分裂周期短    B 有接触抑制现象   C 对环境敏感  D对培养基要求高
47. 不属于植物的次级代谢产物的是：（      ）
A皂苷    B 氨基酸   C 黄酮类   D生物碱
48. 不能用于单细胞克隆培养的技术是：（     ）
A  稀释铺板法 B饲养层克隆法C胶原膜板法D． 单克隆法
49. 目的基因的常用制备方法有：（   ）
A．提取法   B  PCR法   C离心法   D水解法
50. 基因工程药物分离纯化工艺应遵循的原则有（      ）
A 具有良好稳定性    B 尽量增加工艺步骤   C尽量在高温条件下进行   
D设备条件要求高

单选题（答案）
1.D   2.B   3.A   4.D   5.A   6.A   7.A   8.D  9.A   10.D
11.A  12.B  13.A  14.A  15.C  16.D  17.A  18.B  19.D  10.A
21.A  22.B  23.C  24.D  25.A  26.A  27.B  28.B  29.A  10.A
31.B  32.D  33.C  34.A  35.D  36.D  37.B  38.A  39.A  10.A
41.A  42.C  43.A  44. A  45.B  46.A  47. B  48.D  49.B  10.A
简答题
简答题
1.       利用微生物发酵法生产酶具有哪些优点？
2.       离体培养的动物细胞可按照其对生长基质的依赖性分为哪几类？
3.       转基因植物有哪些类型？
4.     常用的酶分离纯化方法有哪些？
5.       什么是次生代谢产物？ 如何通过诱导毛状根产生进行次生代谢产物的生产？
6.       利用微生物发酵法生产酶具有哪些优点？
7 .      与传统固定化酶相比，无载体酶具有哪些优点？
8.       酶的分离纯化过程中，有哪些注意事项？
9.      与微生物培养基相比，植物细胞的培养基有哪些差别？
10.     植物细胞培养具有哪些特性？
11.  有哪些类型的动物细胞生物反应器？
12.  酶的分离纯化过程中，有哪些注意事项？
13.  生产用非基因工程动物细胞的种类及其特点？
14. 请说出三种类型的转基因植物?
15. 单细胞克隆培养技术有哪些？
16. 酶的分离纯化主要有哪些步骤？具体可采用哪些方法？
17. 什么是初生代谢产物和次生代谢产物？ 如何通过诱导毛状根产生进行次生代谢产物的生产？
18. 基因工程中常用的工具酶有哪些？
19.   固定化对酶的稳定性有哪些影响？
20.   离体培养的动物细胞可按照其对生长基质的依赖性分为哪几类？
21.   细胞因子共有的特征有哪些？

简答题(答案)
1.利用微生物发酵法生产酶具有哪些优点？
微生物种类繁多，酶的品种齐全，几乎自然界中存在的所有酶都可以在微生物中找到；
微生物生长繁殖快，生物周期短，因而酶的产量高；
生产成本低，培养微生物的原料大部分比较便宜，与利用动植物细胞培养制备酶要经济得多；
由于微生物具有较强的适应性和应变能力， 可以通过筛选、诱变等方法培育出高产菌种。
2.离体培养的动物细胞可按照其对生长基质的依赖性分为哪几类？
贴壁依赖性细胞：大多数动物细胞（包括非淋巴组织细胞和许多异倍体细胞）在体外的生长必需有给以贴附的支持物表面，细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长和增殖；并且在支持物表面生长时，常常失去它们在动物体内的原有特征，一般呈成纤维细胞型或上皮细胞型；
非贴壁依赖性细胞：来源于血液、淋巴组织的细胞和杂交瘤细胞等在体外培养时，无需固体支持物，即可在培养液中悬浮生长，细胞一般呈圆形；
兼性贴壁细胞：有些细胞对固体支持物的依赖性不严格，可以贴壁生长，但在一定条件下，也可悬浮生长。它们贴壁生长时呈上皮或成纤维形态，悬浮培养时则呈圆球形。
3.转基因植物有哪些类型？
抗除草剂转基因植物；
抗虫基因植物；
抗病基因植物；
抗逆境基因植物；
品质改良基因植物；
代谢修饰的基因植物；
生产药物的基因植物。

4.常用的酶分离纯化方法有哪些？
分离原理 分离方法
分子极性与溶解度 等电点沉淀、有机溶剂沉淀、盐析等
分子大小 凝胶过滤、膜分离、离心等
电荷性质 离子交换层析、等电聚焦、电泳等
疏水作用 疏水层析、反相色谱等
生物亲和性 亲和色谱、免疫吸附层析等

5.什么是次生代谢产物？ 如何通过诱导毛状根产生进行次生代谢产物的生产？
次生代谢产物： 包括许多种类的小分子化合物，它们是由初生代谢的中间体经过一些独特的代谢途径而派生出来的，如酚类、黄酮类、香豆素、皂苷、生物碱等，这些次生代谢产物虽然不是植物生命体的主要组成， 但在保持植物生命的抗逆性、抗病性和抗虫性以及担当信号分子方面起着重要作用，而且很多可以成为天然的药用活性化合物以及先导化合物， 是药物和工业原料的重要来源之一。
毛状根：一些次生代谢产物只在植物的根里大量产生，而正常根培养有生长较慢和收获困难的缺点。 毛状根是植株或其组织、器官、细胞受到发根农杆菌感染后发生病理变化而形成的类似头发一样众多而细长的根组织。毛状根生长迅速，且易于培养，培养过程中无需加入激素；产生次生代谢物的能力强；在遗传上较为稳定且易于操作，可通过基因工程的方法，增加次生代谢产物的产量。
可以利用直接注射法、外植体接种感染法和原生质体共培养法等方法进行毛状根的诱导，然后通过筛选和鉴定，建立发根迅速、分枝较多的毛状根进行扩大培养。
6.利用微生物发酵法生产酶具有哪些优点？
微生物种类繁多，酶的品种齐全，几乎自然界中存在的所有酶都可以在微生物中找到；
微生物生长繁殖快，生物周期短，因而酶的产量高；
生产成本低，培养微生物的原料大部分比较便宜，与利用动植物细胞培养制备酶要经济得多；
由于微生物具有较强的适应性和应变能力， 可以通过筛选、诱变等方法培育出高产菌种。
7.与传统固定化酶相比，无载体酶具有哪些优点？
催化活性高，成本低；
具备较高的催化剂比表面；
可加入多种酶；
底物扩散受限较少；
在极端条件、有机溶剂和蛋白酶中的稳定性较高。
8.酶的分离纯化过程中，有哪些注意事项？
全部操作一般在低温（0-4℃）进行；
在分离提纯过程中，不能剧烈搅拌；
在提纯溶剂中，经常需要加入一些保护剂，如： 少量的EDTA、少量的β-巯基乙醇等；
在分离提纯过程中，要不断地测定酶活力和蛋白质浓度，以对纯化过程进行监测。
9..与微生物培养基相比，植物细胞的培养基有哪些差别？
植物细胞的生长和代谢需要大量的无机盐；
植物细胞的生长需要多种维生素和植物生长激素；
植物细胞要求的氮源一般为无机氮源，主要以硝酸盐和铵盐为主；
植物细胞一般以蔗糖为碳源。
10.植物细胞培养具有哪些特性？
（1）植物细胞较微生物细胞大得多，有纤维素细胞壁，细胞耐拉不耐扭，抵抗剪切力差；
（2）具有群体效应、无锚地依赖性及接触抑制性；
（3）细胞生长的中期及对数期，易凝聚为直径达350-400微米的团块，悬浮培养较难；
（4）培养时需供氧，培养液粘度大，不能耐受强力通风搅拌；
（5）培养细胞产物滞留于细胞内，且产量较低；
（6）培养过程具有结构与功能全能性。
11.有哪些类型的动物细胞生物反应器？
搅拌式生物反应器；（2）气升式生物反应器；（3）中空纤维式生物反应器；
（4）透析袋式或膜式生物反应器；（5）固定床或流化床式生物反应器.
12.   酶的分离纯化过程中，有哪些注意事项？
全部操作一般在低温（0-4℃）进行；
在分离提纯过程中，不能剧烈搅拌；
在提纯溶剂中，经常需要加入一些保护剂，如： 少量的EDTA、少量的β-巯基乙醇等；
在分离提纯过程中，要不断地测定酶活力和蛋白质浓度，以对纯化过程进行监测。
13.生产用非基因工程动物细胞的种类及其特点？
原代细胞： 直接将动物组织或器官经过粉碎、消化而制得的悬浮细胞，称为原代细胞。原代细胞不能直接从细胞库获得，而只能临时用动物组织制备，因此非常费钱费力。目前常用的原代细胞有：鸡胚细胞、兔肾或鼠肾细胞和淋巴细胞等。
传代细胞系：原代细胞经过传代、筛选、克隆等步骤，从多种细胞中纯化得到的某种具有一定特征的细胞，称为传代细胞系。细胞经传代后，分裂增殖旺盛，能保持一致的二倍体核型。传代细胞属于有限细胞系，一般连续传代培养30-50代之后，就会逐渐失去增殖能力，无致瘤性。 
转化细胞系： 这类细胞是经过某个转化过程得到的，通常是由于染色体的断裂而变成异倍体，从而失去正常细胞的特点而获得无限增殖的能力。转化的方法可以是人为的，如：应用病毒感染或使用化学试剂；也可以是自发的，如在传代过程中，个别的细胞可以自发转化为有无限生命力的细胞系。此外，直接从动物肿瘤组织中建立的细胞系也属于转化细胞。 由于转化细胞系具有无限的生命力，较短的倍增时间，以及较低的培养条件要求，所以更适合大规模工业化的生产需求。
14.请说出三种类型的转基因植物
1.抗除草剂转基因植物；
2.抗虫基因植物；
3.抗病基因植物；
4.抗逆境基因植物；
5.品质改良基因植物；
6.代谢修饰的基因植物；
7.生产药物的基因植物。
以上答案中，只要答出三种即可。
15.单细胞克隆培养技术有哪些？
稀释铺板法；
饲养层克隆法；
胶原膜板法；
血纤维蛋白膜层析克隆法；
（5） 软琼脂平板克隆法。
16.酶的分离纯化主要有哪些步骤？具体可采用哪些方法？
原材料的选择和预处理： 选择含目的酶较为丰富的原料进行提纯 ；预处理：采用沉淀法、变性法、絮凝和凝聚等方法除去发酵液中的无机离子、杂蛋白等，以及采用活性碳、离子交换树脂等去除色素等物质；
酶的分离： 又称初步纯化，常采用盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀和离心等技术将目的酶与其他杂蛋白质分开；
酶的精制： 即酶的高度纯化，采用凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析、亲和层析和电泳等规模小、分辨率高的手段对酶进行进一步的纯化；
酶的浓缩干燥及结晶： 即使酶与溶剂分离并结晶得到酶制剂的过程，采用：旋转蒸发、透析、超滤、冷冻干燥等方法。
17.什么是初生代谢产物和次生代谢产物？ 如何通过诱导毛状根产生进行次生代谢产物的生产？
初生代谢产物：包括糖、淀粉、脂肪酸、氨基酸、蛋白质、核苷和核苷酸在内的植物体代谢产物，叫初生代谢产物。这些初生代谢产物基本上满足了植物本身的生命活动需要。
次生代谢产物： 包括许多种类的小分子化合物，它们是由初生代谢的中间体经过一些独特的代谢途径而派生出来的，如酚类、黄酮类、香豆素、皂苷、生物碱等，这些次生代谢产物虽然不是植物生命体的主要组成， 但在保持植物生命的抗逆性、抗病性和抗虫性以及担当信号分子方面起着重要作用，而且很多可以成为天然的药用活性化合物以及先导化合物， 是药物和工业原料的重要来源之一。
毛状根：一些次生代谢产物只在植物的根里大量产生，而正常根培养有生长较慢和收获困难的缺点。 毛状根是植株或其组织、器官、细胞受到发根农杆菌感染后发生病理变化而形成的类似头发一样众多而细长的根组织。毛状根生长迅速，且易于培养，培养过程中无需加入激素；产生次生代谢物的能力强；在遗传上较为稳定且易于操作，可通过基因工程的方法，增加次生代谢产物的产量。
可以利用直接注射法、外植体接种感染法和原生质体共培养法等方法进行毛状根的诱导，然后通过筛选和鉴定，建立发根迅速、分枝较多的毛状根进行扩大培养。
18.基因工程中常用的工具酶有哪些？
核酸限制性内切酶
DNA连接酶
聚合酶
19.固定化对酶的稳定性有哪些影响？
提高酶的热稳定性，使得酶催化反应能在较高温度下进行，加快反应速度，提高酶作用效率；
提高酶对有机试剂和酶抑制剂的稳定性，使本来不能在有机相中进行的酶反应成为可能；
由于固定化后酶分子与载体多点连接，可防止酶分子伸展变形，抑制酶的自降解，从而提高了酶对PH、 蛋白酶、贮存和操作条件的稳定性。

20.离体培养的动物细胞可按照其对生长基质的依赖性分为哪几类？
（1）贴壁依赖性细胞：大多数动物细胞（包括非淋巴组织细胞和许多异倍体细胞）在体外的生长必需有给以贴附的支持物表面，细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长和增殖；并且在支持物表面生长时，常常失去它们在动物体内的原有特征，一般呈成纤维细胞型或上皮细胞型；
（2）非贴壁依赖性细胞：来源于血液、淋巴组织的细胞和杂交瘤细胞等在体外培养时，无需固体支持物，即可在培养液中悬浮生长，细胞一般呈圆形；
（3）兼性贴壁细胞：有些细胞对固体支持物的依赖性不严格，可以贴壁生长，但在一定条件下，也可悬浮生长。它们贴壁生长时呈上皮或成纤维形态，悬浮培养时则呈圆球形。
21.细胞因子共有的特征有哪些？
（1）来源的多源性： 一种细胞因子可以来源于多种细胞，同时，一种刺激物可以诱导同种细胞产生多种细胞因子；
（2）多效性： 一种细胞因子在不同的环境或时间下，可以发挥多种不同的生物学功效；
（3）高效性：微量的细胞因子就能引起非常明显的生物学效应，因此具有微量、高效的特点；
（4）快速反应性：对激发因素的反应迅速，这也是其高效性的保证之一；
（5）理化性质：A。细胞因子的化学本质为大分子多肽或蛋白，绝大部分为糖蛋白，但糖基成分对大部分细胞因子的生物学活性影响不大；B。多为单链分子，不存在蛋白质合成后的组装；C. 多具有分泌型激素的特性。D。 分子量均小于80KD， 其基因增色为单拷贝。

名词解释

名词解释
1.植物细胞工程   
2.生长因子   
3.质粒  
4.细胞传代  
5.动物细胞工程
6.酶工程   
7.细胞克隆培养   
8.微生物工程   
9.细胞因子  
10.现代生物制药技术  
11.初生代谢产物  
12.固定化酶  
13.次生代谢产物  
14.转基因动物  
名词解释（答案）
1.植物细胞工程：根据生物学原理及工程学原理，定向改造植物细胞遗传性，利用植物细胞为人类生产名贵药品及提供服务的技术。
2.生长因子：指某些微生物在生命活动过程中必须从外界环境中摄取的某些微量的有机化合物，如维生素、氨基酸和碱基等。
3.质粒：  在细菌细胞内作为与宿主染色体有别的复制子而进行复制并且在细胞分裂时能恒定地传递给子代细胞的独立遗传因子。
4.细胞传代：将细胞从一个培养器皿中消化、分散并接种至另一培养器皿中的操作。
5.动物细胞工程：根据细胞生物学及工程学原理，定向改造动物细胞遗传性，创造新物种，通过工程化为人类提供名贵药品及提供服务的技术。
6.酶工程：从应用的目的出发，研究、利用酶的特异性催化功能，通过适当的工艺将相应的原料转化为有用物质。
7.细胞克隆培养:即单细胞分离培养，是将动物组织分散后，将一个细胞从群体细胞中分离出来，由单个细胞培养成纯系细胞集群。
8.微生物工程： 把所有通过微生物培养而生产的对人类有益的产品或提供服务的技术称为微生物工程，或发酵工程。
9.细胞因子： 人类或动物的各类细胞分泌的具有多种生物活性的因子。
10.现代生物制药技术： 利用微生物或哺乳动物细胞等生物体系，采用先进的生物学和工程学技术，有目的、有计划、定向地加工制造药品的技术。
11.初生代谢产物：包括糖、淀粉、脂肪酸、氨基酸、蛋白质、核苷和核苷酸在内的植物体代谢产物，叫初生代谢产物。这些初生代谢产物基本上满足了植物本身的生命活动需要。  
12.固定化酶：是指在一定空间内呈闭锁状态存在的酶，能连续地进行反应，反应后的酶可以回收重复使用。
13.次生代谢产物：包括许多种类的小分子化合物，它们是由初生代谢的中间体经过一些独特的代谢途径而派生出来的，如酚类、黄酮类、香豆素、皂苷、生物碱等。
14.转基因动物：采用基因工程技术将外源目的基因导入动物生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎，并在受体动物的染色体上稳定整合，又经过各种发育途径能把外源目的基因稳定地传给子代，所获得的动物。

综合题
综合应用题
1.为什么要对酶进行化学修饰？化学修饰酶在医药和生物技术中有哪些应用？
2.试述动物细胞工程在制药工业上的应用。
3.试述转基因植物生产药物的安全性问题。
4.酶的分离纯化主要有哪些步骤？具体可采用哪些方法？
5.试述植物细胞工程在制药工业上的应用。
6.动物细胞的大规模培养方法及其特点
7.什么是初生代谢产物和次生代谢产物？ 如何通过诱导毛状根产生进行次生代谢产物的生产？
8.举例说明酶工程在制药工业中的应用。
9.生产用非基因工程动物细胞的种类及其特点？

综合题（答案）

1.  为什么要对酶进行化学修饰？化学修饰酶在医药和生物技术中有哪些应用？
原因： 作为生物催化剂，酶虽然有很多优点，但是与化学催化剂相比，又有很多缺点，如：稳定性差、分子量过大、成本高、来源有限、有异体反应等，使酶的应用受到很大限制。酶的化学修饰就是通过对酶进行改造、模拟，甚至创造出全新的非天然酶，来克服上述缺点，使酶发挥更大的催化效能，以适应各种不同需求。
应用： 如：通过选择合适的化学修饰剂和修饰方法，可以提高医用酶的稳定性，延长它的半衰期，降低免疫原性，提高渗透性，改善药物在体内生物分布或代谢行为等；在生物技术领域，化学修饰酶能提高酶对酸、碱和有机溶剂的耐受能力，改变酶的底物专一性和最适PH等酶学性质，还可以创造新的催化性能。
2.  试述动物细胞工程在制药工业上的应用。
可从以下几方面中选取一方面进行论述：
利用动物细胞培养大规模生产重组蛋白；
转基因动物生产药物；
转基因动物作为药物筛选模型。
3.   试述转基因植物生产药物的安全性问题。
可能存在安全性问题有：
（1）转基因植物中的新基因是否能传递给人畜肠道的正常微生物，引起菌群和数量的变化，或插入并表达，从而危害人畜健康？
（2）是否会对环境和生态产生不同程度的负面影响？
对其安全性进行综合评价：
（1）政府在制定科学的评价体系和严格的法律法规；
（2）制定相应的配套的检测实验技术。
4.  酶的分离纯化主要有哪些步骤？具体可采用哪些方法？
（1）原材料的选择和预处理： 预处理：采用沉淀法、变性法、絮凝和凝聚等方法除去发酵液中的无机离子、杂蛋白等，以及采用活性碳、离子交换树脂等去除色素等物质；
（2）酶的分离： 又称初步纯化，常采用盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀和离心等技术将目的酶与其他杂蛋白质分开；
（3）酶的精制： 即酶的高度纯化，采用凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析、亲和层析和电泳等规模小、分辨率高的手段对酶进行进一步的纯化；
（4）酶的浓缩干燥及结晶： 即使酶与溶剂分离并结晶得到酶制剂的过程，采用：旋转蒸发、透析、超滤、冷冻干燥等方法。
5.   试述植物细胞工程在制药工业上的应用。
可具体论述，不要求必需与本答案一致，只要相关即可。
（1）利用植物细胞培养生产天然药物，如人参细胞培养、红豆杉细胞培养、利用植物细胞培养进行生物转化；
（2）利用转基因植物生产抗体、重组疫苗、多肽类药物等。
6.   动物细胞的大规模培养方法及其特点
（1）悬浮培养法：细胞在培养液中呈悬浮状态生长繁殖。 适用于非贴壁依赖性细胞和兼性贴壁细胞。特点：可连续测定细胞浓度，连续收集部分细胞进行继代培养；无需消化，细胞收率较高。
（2）微载体培养法：适用于贴壁依赖性细胞和兼性贴壁细胞，这二种细胞吸附于直径60-250μm的微载体表面长成单层，在培养液中进行悬浮培养。该法克服了常规贴壁培养的缺点，使贴壁细胞的培养具有悬浮培养和固定化培养的优点。 
（3）多孔载体培养法：将细胞接种到多孔载体的内部孔洞中，即可以用于悬浮细胞的固定化连续灌流培养，又可用于细胞的贴壁培养。由于细胞在载体的内部生长，因此可免受搅拌等造成的机械损伤。
（4）微囊化培养法： 将细胞包裹在微囊中进行悬浮培养，细胞受到微囊外壳的保护，免受搅拌对细胞的机械损伤。
（5）中空纤维培养法：把细胞接种到中空纤维的外腔，利用中空纤维模拟人工毛细血管供给营养，使细胞高密度生长。
7.  什么是初生代谢产物和次生代谢产物？ 如何通过诱导毛状根产生进行次生代谢产物的生产？
初生代谢产物：包括糖、淀粉、脂肪酸、氨基酸、蛋白质、核苷和核苷酸在内的植物体代谢产物，叫初生代谢产物。这些初生代谢产物基本上满足了植物本身的生命活动需要。
次生代谢产物： 包括许多种类的小分子化合物，它们是由初生代谢的中间体经过一些独特的代谢途径而派生出来的，如酚类、黄酮类、香豆素、皂苷、生物碱等，这些次生代谢产物虽然不是植物生命体的主要组成， 但在保持植物生命的抗逆性、抗病性和抗虫性以及担当信号分子方面起着重要作用，而且很多可以成为天然的药用活性化合物以及先导化合物， 是药物和工业原料的重要来源之一。
毛状根：一些次生代谢产物只在植物的根里大量产生，而正常根培养有生长较慢和收获困难的缺点。 毛状根是植株或其组织、器官、细胞受到发根农杆菌感染后发生病理变化而形成的类似头发一样众多而细长的根组织。毛状根生长迅速，且易于培养，培养过程中无需加入激素；产生次生代谢物的能力强；在遗传上较为稳定且易于操作，可通过基因工程的方法，增加次生代谢产物的产量。
可以利用直接注射法、外植体接种感染法和原生质体共培养法等方法进行毛状根的诱导，然后通过筛选和鉴定，建立发根迅速、分枝较多的毛状根进行扩大培养。
8.  举例说明酶工程在制药工业中的应用。
结合具体实例，说明酶工程在制药工业中的应用，如进行生物转化、生物催化、生物发酵等。从而克服化学合成的不足，降低生产成本和周期，获得高产量。
9. 生产用非基因工程动物细胞的种类及其特点？
（1）原代细胞： 直接将动物组织或器官经过粉碎、消化而制得的悬浮细胞，称为原代细胞。原代细胞不能直接从细胞库获得，而只能临时用动物组织制备，因此非常费钱费力。目前常用的原代细胞有：鸡胚细胞、兔肾或鼠肾细胞和淋巴细胞等。
（2）传代细胞系：原代细胞经过传代、筛选、克隆等步骤，从多种细胞中纯化得到的某种具有一定特征的细胞，称为传代细胞系。细胞经传代后，分裂增殖旺盛，能保持一致的二倍体核型。传代细胞属于有限细胞系，一般连续传代培养30-50代之后，就会逐渐失去增殖能力，无致瘤性。 
（3）转化细胞系： 这类细胞是经过某个转化过程得到的，通常是由于染色体的断裂而变成异倍体，从而失去正常细胞的特点而获得无限增殖的能力。转化的方法可以是人为的，如：应用病毒感染或使用化学试剂；也可以是自发的，如在传代过程中，个别的细胞可以自发转化为有无限生命力的细胞系。此外，直接从动物肿瘤组织中建立的细胞系也属于转化细胞。 由于转化细胞系具有无限的生命力，较短的倍增时间，以及较低的培养条件要求，所以更适合大规模工业化的生产需求。

上一条：无
下一条：吉林省自考本科药物化学 07957